藍莓是一種是低灌木，矮腳野生，顆粒小，含豐富花青素；第二種是人工培育藍莓，能成長至 240cm 高，果實較大，果肉飽滿，改善了野生藍莓的食用口感，增強了人體對花青素的吸收。本文是一篇農藝師論文范文，主要論述了藍莓外植體消毒的幾種方法對比研究。

　　摘要：通過對比不同種類消毒劑、不同消毒時間對藍莓莖段消毒效果，以篩選出最適合藍莓消毒的方法，結果表明，最適合藍莓外植體消毒的方法：0.1%HgCl2浸泡9min。本研究結果將為藍莓外植體消毒提供借鑒。

　　關鍵詞：藍莓,外植體,消毒

　　藍莓，杜鵑花科，越桔屬，多年生灌木小漿果果樹。藍莓果實中花青素、多酚等抗氧化物質的含量很高(楊紅澎，2010)，能使心血管的功能有所改善，積累的膽固醇的量有所下降。一些專家學者為了產業化快速培育藍莓種苗，已經開展了對其組織培養體系的研究(劉太林，2012)。

　　1.材料與方法

　　1.1供試材料

　　組培所用的藍莓枝條為半高叢藍莓北藍品種，于2014年5月采自于遼寧林業職業技術學院藍莓實驗基地。

　　1.2材料處理

　　將休眠植株的木質化枝條沖洗干凈，插于水桶中放在25℃的溫室中，每天換1次清水。1周后枝條頂芽和上部側芽陸續伸長，新葉逐漸展開。2～3周時采取新抽出的嫩枝為外植體。

　　1.3外植體表面消毒

　　剪取藍莓嫩枝條，用自來水沖洗干凈，并加少量洗衣粉洗滌，攪動5min，再用自來水沖洗約60min，剪成約1～2cm的小段。用70%酒精、含1%吐溫80的0.75%次氯酸鈉溶液和0.1%升汞溶液及不同的消毒時間組合，對莖段進行消毒處理，共設計了9種對藍莓莖段的消毒試驗方案：分別以70%酒精、0.75%NaCIO、0.1%HgCl2各消毒7、9、11min。消毒時不斷搖動，消毒后的莖段用無菌水沖洗4次，吸干水分，再用無菌紙瀝干備用。切去基部受損組織，按無菌操作要求接種于培養基上，觀察在不同消毒時間內使用不同消毒劑后的消毒效果。

　　1.4數據處理

　　依據上述辦法進行藍莓接種，每種消毒方式接種3次，記錄消毒效果。

　　污染率=(外植體中染菌的數量/所有接種的外植體總數)×100%

　　死亡率=[(死亡的外植體數量+愈傷失敗的外植體數量)/接種外植體的總數]×100%

　　2.結果與分析

　　通過統計方法，可以計算出藍莓外植體的污染率和死亡率(周歷萍等，2011)，污染率分別為96.70%、86.70%、83.30%、93.70%、90.00%、80.00%、66.70%、43.30%、53.30%;所對應的死亡率分別為0、0、3.30%、3.30%、0、3.30%、0、0、6.70%。因此，在此試驗中，最適合藍莓外植體消毒的方法：0.1%HgCl2浸泡9min，可為藍莓組織培養的研究提供理論依據。

　　從結果中我們不難看出，所選消毒時間在外植體能承受的范圍內，單一的處理時間越長，效果越好，污染率越低。但0.1%HgCl2毒力強，對植物材料殺傷性較強，消毒時間過長，容易對植物材料造成損失。除第7種處理方式外，各消毒劑中，0.1%HgCl2因其在短時間內可對外植體表面菌起到毒害作用，因而消毒效果要好于70%酒精。70%的酒精也有較強滲透力，通過很快穿入植物體內毒害外植體表面菌，消毒的效果要比次氯酸鈉明顯。而2%次氯酸鈉最差，2%次氯酸鈉消毒7min的消毒效果遠不及其他處理方式的消毒效果，污染率最高;0.1%HgCl2消毒9min的消毒效果最好，最終成為此次試驗藍莓外植體消毒方法。

　　3.討論

　　陶興魁等(陶興魁等，2013)研究表明：“一般而言，菌類污染污染率應控制在8%以內，消毒劑的使用既要能夠把外植體上的病菌殺滅，又必須容易被無菌水從外植體上沖洗掉或自行分解而不至于對外植體本身產生毒害作用，影響其生長。0.1%的升汞因其有劇毒，且消毒后難以除去殘余的汞，對外植體有殺傷作用，所以使用后要應用大量無菌水沖洗多次，減少其對植物的毒害作用。2%NaClO容易清洗，但同時對外植體上的病菌的殺害作用也隨之減少。70%酒精滲透力很強，在短時間內便可進入植物細胞行使其毒力作用，所以應用酒精消毒一般是在15～30s之內，即便這樣，也可能會造成外植體一定的死亡率。”

　　在消毒過程中，消毒劑具有很強的殺傷力和穿透力，容易殺死或損失植物細胞，造成外植體長勢不良，因此在植物組織培養過程中，要盡量降低污染率，同時還要盡可能減少消毒劑對外植體的傷害。

　　農藝師論文發表期刊推薦《植物營養與肥料學報》現為雙月刊，大16開本，單月25日出版。國內刊號：CN11-3996/S，國際刊號：ISSN 1008-505X。國內郵發代號：82-169，由中國國際圖書貿易總公司向國外發行。