本文選自國家級期刊《農業環境與發展》，《農業環境與發展》雜志創刊于1984年，農業部主管、農業部環境保護科研監測所與中國農業生態環境保護協會聯合主辦的國家級綜合指導類科技期刊，為中國 農業核心期刊。傳播農業可持續發展新思想、新觀點、新方略，倡導農業生產、農民生活、農村生態協調發展理念，多視角、多層次、多學科地反映食品安全與健 康、資源開發與利用、環境污染與防治、農業清潔生產與農村循環經濟等熱點問題，直接面向農業、環保、食品、能源、衛生等領域的科研、教學、生產、管理、技 術推廣人員與大眾讀者。

　　摘要：本文采用的是靛酚藍分光光度法測定氨氮，這種方法重現性好，空白值低，含氮有機物不被測定，但缺點是反應較慢、靈敏度略低。該分析方法中需要配制的實際較多，實際操作中藥注意把握好操作要領，正確分析樣品，下面就此做具體論述！

　　關鍵詞：氨氮,近岸海水,測定

　　氨氮是海水中生原要素之一，其含量是重要的營養鹽指標，更是標志海水無機污染物污染程度和發展趨勢的重要環境因子。生物的生命活動對氨氮含量有直接的影響，并且有變化范圍大、速度快的特點。

　　1實驗部分

　　1.1方法原理

　　在弱堿性介質中，以亞硝酰鐵氰化鈉為催化劑，氨與苯酚和次氯酸鹽反應生成靛酚藍，在640nm處測定吸光值。

　　1.2主要儀器

　　1.2.1721分光光度計。

　　1.2.250mm玻璃比色皿。

　　1.2.350ml玻璃磨口具塞比色管若干。

　　1.3主要試劑

　　1.3.1銨標準貯備液：稱取0.4716g硫酸銨（預先在110℃烘干1h，置于干燥器中冷卻），溶于少量水中，全量轉入1000ml的容量瓶中，加水至標線，混勻。加1ml三氯甲烷，振搖混合。貯存于棕色試劑瓶中，冰箱內保存。此溶液1.00ml含氨氮100，有效期半年。

　　1.3.2銨標準使用溶液：移取10.0ml銨標準貯備液置于100ml容量瓶中，加水至標線，混勻，此溶液1.00ml含氨氮10.0μg。臨用時配制。

　　1.3.3檸檬酸鈉溶液：稱取240g檸檬酸鈉溶于500ml水中，加入20ml氫氧化鈉溶液，加入數粒防爆沸石，煮沸除氨至溶液體積小于500ml。冷卻后用水稀釋至500ml。盛于聚乙烯瓶中。此溶液長期穩定。

　　1.3.4苯酚溶液：稱取38g苯酚和400mg亞硝酰鐵氰化鈉，溶于少量水中，稀釋至1000ml，混勻。盛于棕色試劑瓶中，冰箱內保存。此溶液可穩定數月。

　　1.3.5次氯酸鈉使用溶液：用氫氧化鈉溶液稀釋一定量的次氯酸鈉溶液，使其中100l中含150mg有效氯。此溶液盛于聚乙烯瓶中置冰箱內保存，可穩定數周。

　　注意：配制之前要標定，計算要正確。

　　1.4分析步驟

　　1.4.1校準曲線繪制。取6個100ml容量瓶，分別加入0、0.30、0.60、0.90、1.20、1.50ml銨標準使用液加純水或無氨海水至標線，混勻。移取35.0ml上述各點溶液，分別置于50ml具塞比色管中，依次加入1.0ml檸檬酸鈉溶液，混勻；1.0ml苯酚溶液，混勻。1.0ml次氯酸鈉使用溶液，混勻。放置一定時間，在640nm波長處，50mm測定池，以水作參比溶劑，測定吸光度，繪制標準曲線。

　　1.4.2樣品的測定。移取35.0ml已過濾的水樣置于50ml比色管中，按上述方法測定吸光度，計算水樣中的氨氮濃度mg/L。

　　2結果和討論

　　2.1比色管的校正

　　因比色管存在管壁厚薄不均、管徑誤差、對入射光的散射和反射以及硬物摩擦劃傷等因素，將影響閉塞的結果，因此需要對比色管進行校正。在潔凈干燥的比色管中放入8ml去離子水，選擇一支無瑕疵且表面光潔度較好的比色管作為空白，用便攜式分光光度計比色測定，剔出吸光度超過±0.003的比色管，選擇剩余的比色管用于曲線的繪制和樣品測定。

　　2.2標準曲線方程

　　按1.4.1分析步驟繪制校準曲線，氨氮的濃度（X）在0.04~2.0mg/L之間與吸光度（Y）具有良好的線性關系，線性方程為Y=0.0167X-0.003，線性相關系數r=0.9998。

　　2.3方法檢出限

　　根據文獻，本方法取扣除空白值后與0.01吸光度對應的濃度值0.04mg/L作為檢出限。

　　2.4方法對比

　　在同一時間采集不同地點的海水水質樣品，分別用本方法進行測定，測定結果列于表1.由表1可以看出，本方法分析后所得的數據吻合程度較好，沒有顯著性差異，測定結果的相對偏差均小于文獻[1]的指標，因此兩種測定方法測定結果具有較好的可比性。

　　表1環境水質樣品測定結果

　　水樣海洲灣旅游度假區某一海域水相對偏差/%

　　本方法測定結果/mg·L-100110.0104.76

　　2.5方法精密度

　　取近岸海水水質樣品按樣品測定的程序進行6次平行測定，測定結果見表2可以看出，實際海水水質樣品分析的相對標準偏差均在4.27%一下，說明該方法具有良好的精密度。

　　表2精密度試驗結果

　　海水水樣測定結果/mg·L-1平均值/mg·L-1RSD/%

　　某一海域水0.0370.0400.039

　　0.0390.0370.0380.0381.21

　　海洲灣旅游度假區0.0580.0500.051

　　0.0590.0600.0540.0554.27

　　2.6加標回收試驗

　　對不同的海水水質樣品進行測定，然后進行加標回收試驗，試驗結果列于表3。由表3可知，本方法的加標回收率為90%~106%，說明該方法準確度較高符合文獻[1]的要求。

　　表3加標回收試驗結果

　　海水水樣本底值/mg·L-1加標量/mg·L-1測得值/mg·L-1回收率/%

　　某一海域水0.0120.0100.02190

　　海洲灣旅游度假區0.0580.0501.0798

　　3注意事項

　　3.1本方法中可采集氨氮低于0.8g的海水，用0.45μm濾膜過濾后貯于聚乙烯桶中，每升海水加1ml三氯甲烷，混合后可作為無氨海水使用。

　　3.2配制苯酚溶液時，若發現苯酚出現粉紅色則須精制后方可使用。

　　3.3經實驗，加緩沖溶液及顯色劑時，加液及搖勻等操作時間要及時、緊湊，稍有不妥，則曲線不合格或者線性不好，對樣品的測定結果有一定影響。

　　3.4顯色時間的確定

　　在《海洋監測規范》靛酚藍分光光度法測定暗淡中，要求加完顯色劑后放置6h以上，但經實驗發現，顯色時間的確定是由反應溫度所決定，反應溫度高，顯色時間短，反之則長。注意：樣品和標準溶液的顯色時間保持一致，并避免陽光照射。實驗情況見下表：

　　試驗時間反應溫度（℃）顯色時間（min）平行樣檢驗（mg/L）加標回收率（%）

　　2003.6.1125.0300.00196

　　2003.8.2030.0150.00292

　　2003.10.2315.0400.00195

　　2003.11.610.560以上0.00294

　　3.5氨氮曲線的繪制盡量用無氨海水，以便減小計算結果時帶來的誤差，在測定過程中要避免空氣中的氨對水樣或試劑的玷污。

　　參考文獻

　　1中華人民共和國國家標準海洋監測規范第4部分，中國標準出版社。

　　2中國環境監測總站環境水質監測質量保證手冊（第2版）