扁形動物門(Platyhelminthes)渦蟲綱(Turbellaria)的代表動物。Planaria指真渦蟲屬，而planarian一詞則指片蛭科(Planariidae)及近緣科的動物。本文是一篇研究生論文范文，主要論述了日本三角渦蟲全能干細胞的分離培養與鑒定。

　　摘要：渦蟲具有極強的再生能力，并且認為渦蟲體內存在一類具有增殖分化潛能被稱為neoblasts的全能干細胞。這種細胞在渦蟲體內可發生遷移、增殖和分化，對其個體組織器官損傷的修復具有重要作用。本實驗中，三角渦蟲經過饑餓處理后切取特定的組織塊，然后再經過處理使組織塊中的細胞分離出來。分離的細胞繼續培養并通過堿性磷酸酶檢測最終鑒定為neoblasts干細胞。

　　關鍵詞：三角渦蟲,全能干細胞,分離,培養,鑒定

　　渦蟲(Planarian)是動物界最早出現兩側對稱、三胚層、營自由生活的扁形動物，也是由水生向陸生過渡的重要類群，因而在動物系統演化中占有重要地位[1]。渦蟲國內分布廣泛，進化地位十分重要，是發育生物學、細胞遺傳學和再生生物學、進化和遺傳學研究的好材料。Kawakatsu認為中國的淡水三角渦蟲全部屬于三角渦蟲屬中的日本三角渦蟲(Dugesia japonica Ichikawa et Kawakatsu)[2]。不同的地區和環境對其生殖具有一定影響，但大多以有性和無性方式交替進行。渦蟲具有極強的再生能力，已知如果把渦蟲切割成許多小的片段，一周內它可以重新長成完整的個體[3，4]。其再生潛能歸因于體內一類稱為“neoblasts”的細胞群，這是成體渦蟲體內僅有的一類具有增殖分化潛能的干細胞，即成體未分化細胞[5～7]。它在整個個體的間質細胞內都有分布，而在其它類型細胞如上皮細胞、腸細胞、腦部分布較少;在生長、喂養、饑餓狀態下細胞狀態也處于動態的變化[8～9]。其體內neoblasts約占全部細胞的30%，是一種全能干細胞，可分化為體內的40多種細胞，因此成為研究胚胎發育、細胞分化與去分化分子機理的理想材料[10]。

　　迄今為止，體外分離干細胞技術已有很多報道，建立在對細胞表面標記物的識別基礎上用來純化干細胞的標記包括CD34、AC133、STRO-1、神經營養受體p7520等[11]。分離方法包括熒光標記細胞分選、免疫磁分離和免疫吸附柱分離;密度梯度離心法從單個核細胞中分離干細胞也用于渦蟲干細胞的分離[12～13]，但這種方法要求的實驗器材與熟練程度都比較高且操作繁瑣，因此不常用。常用的分離哺乳動物干細胞的方法是通過胰酶處理組織塊，使之消化成單個細胞，再用培養液培養，但處理時會對細胞造成一定程度的損傷。在現代再生科學方面，最早嘗試培養渦蟲細胞是在芝加哥Ch.M.Child’s實驗室[14]。但是直到目前，沒有任何關于穩定培養扁形動物細胞系的報道。最近有neoblasts細胞重要性及其分子相關實驗方面的報道，所以在借鑒國外分離日本三角渦蟲全能干細胞neoblasts方法的基礎上，摸索建立穩定的neoblasts細胞系非常重要[15～17]。

　　干細胞的細胞質中含有較高的堿性磷酸酶(ALP)，而已分化的細胞中活性明顯降低。在堿性磷酸酯酶的催化下，5-溴-4-氯-3吲哚磷酸(BCIP)會被水解產生強反應性的產物，該產物會和氯化硝基四氮唑藍(NBT)發生反應，形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan產物，所以利用這一點可以鑒定細胞是否為干細胞[18～19]。本實驗初步摸索了一種分離培養及鑒定渦蟲全能干細胞neoblasts的方法，為下一步開展渦蟲相關方面的研究提供了一定的基礎。

　　研究生論文發表期刊推薦《北京農學院學報》學報1993年開始出版，1987年成為半年刊，1997年改為季刊。其已加入了《中國學術期刊光盤版》、《中國期刊網》、《中國學術期刊綜合評價數據庫》、《中國科學引文數據庫》、《CHINAINFO信息》.[雜志基本信息]期刊名稱：北京農學院學報，主管單位：北京市教育委員會，主辦單位：北京農學院。