摘要：采用菌落直徑法測定8種殺菌劑對山茶刺盤孢(Colletotrichum camelliae Massee)的毒力并進行田間藥效試驗。結(jié)果表明，山茶刺盤孢對嘧菌酯、咪鮮胺、多菌靈、三唑酮、苯醚甲環(huán)唑和甲基托布津高度敏感，其抑制中濃度(EC50)為0.092 4～2.163 3 μg/mL;對百菌清和代森錳鋅為中度敏感，其EC50分別為5.115 0 μg/mL和11.331 5 μg/mL。田間藥效試驗結(jié)果表明，45%咪酰胺EW(375 g/hm2)的防效最高，達到91.32%;其次為25%嘧菌酯SC(150 g/hm2)和80%多菌靈WP(675 g/hm2)，其防效分別達到86.63%和80.55%;80%甲基托布津WP(500 g/hm2)的防效最低，為63.45%。

　　關鍵詞：農(nóng)業(yè)類核心論文發(fā)表,茶樹,山茶刺盤孢(Colletotrichum camelliae Massee),毒力測定,防治效果

　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.05.018

　　Abstract：The colony diameter law was used to test toxicities of 8 fungicides to Colletotrichum camelliae. The field trials were conducted to determine control effect of fungicides in Xinyang district. The results showed that Colletotrichum camelliae was highly sensitive to Azoxystrobin， Prochloraz， Carbendazim， Difenoconazole， Triadimefon and Thiophanate-methyl with the EC50 value ranging from 0.092 4 to 2.163 3 μg/mL. Colletotrichum camelliae was morderately sensitive to Chlorothalonil and Mancozeb with EC50 value of 5.115 0 and 11.331 5 μg/mL， respectively. The field efficacy showed that the Prochloraz 45% EC 375 g/hm2 was the best with the value of 91.32% control effect. The followings were Azoxystrobin SC 150 g/hm2 and Carbendazim WP 675 g/hm2 with the value of 86.63% and 80.55% control effect. Thiophanate-methyl WP 500 g/hm2 had the lowest control effect with the value of 63.45%.

　　Key words： tea plant; Colletotrichum camelliae; toxicity test; control effect

　　茶樹云紋葉枯病是由山茶刺盤孢(Colletotrichum camelliae Massee)侵染引起的一種廣泛發(fā)生的病害[1]。該病在不同的季節(jié)均有發(fā)生，以老葉發(fā)病較重[2]。茶樹云紋葉枯病也是河南省茶園發(fā)生最普遍、危害最嚴重的病害。特別是秋季人工修剪后的茶園，常使茶樹葉片大量脫落，嚴重影響茶葉的產(chǎn)量和品質(zhì)[3]。茶葉是河南省的主要經(jīng)濟作物之一，信陽是其主產(chǎn)地，種植面積14萬hm2，產(chǎn)量占全省茶葉總產(chǎn)量的90%，約占全國茶葉總產(chǎn)量的2%[4，5]。

　　探求生產(chǎn)上更直接、簡便、經(jīng)濟、高效的防治藥劑和方法措施，對于茶樹云紋葉枯病的防治具有重要意義。噴灑化學藥劑仍是目前防治茶樹云紋葉枯病最直接、最簡便的方法，同時也是最有效的防治方法。本研究采用菌落直徑法，在室內(nèi)測定8種殺菌劑對茶樹云紋葉枯病菌(山茶刺盤孢)的毒力，并根據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果，選擇對茶樹云紋葉枯病菌毒力強的殺菌劑進行田間防效試驗，旨在為茶樹云紋葉枯病的化學防治提供依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　1.1 試驗材料

　　1.1.1 供試菌株 山茶刺盤孢菌株(編號ERC4-9-6)于2012年采自河南省信陽市平橋區(qū)發(fā)病的茶樹葉片，常規(guī)組織分離，置常規(guī)PDA平板上純化后，于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)保存。

　　1.1.2 供試藥劑 25%嘧菌酯SC，先正達(中國) 投資有限公司生產(chǎn);45%咪鮮胺EW，江蘇瑞德邦化工科技有限公司生產(chǎn)，15%三唑酮WP，江蘇建農(nóng)農(nóng)藥化工有限公司生產(chǎn);25%苯醚甲環(huán)唑EC，河南信陽富邦化工股份有限公司生產(chǎn);70%甲基托布津WP和80%多菌靈WP，河北冠龍農(nóng)化有限公司生產(chǎn);70%代森錳鋅WP，山東金正農(nóng)藥有限公司生產(chǎn);50%百菌清WG，百農(nóng)思達(北京)農(nóng)用化學品有限公司生產(chǎn)。

　　1.2 試驗方法

　　1.2.1 藥劑質(zhì)量濃度梯度的設置 根據(jù)預試驗的結(jié)果，嘧菌酯、咪鮮胺和多菌靈分別設1.00、0.50、0.25、0.10、0.05 μg/mL 5個濃度梯度;三唑酮、苯醚甲環(huán)唑和甲基托布津分別設5.00、2.50、1.25、0.50、0.25、0.10 μg/mL 6個濃度梯度;代森錳鋅和百菌清分別設20.00、10.00、5.00、2.50、1.25、0.50、0.10 μg/mL 7個濃度梯度。 　　1.2.2 含藥培養(yǎng)基的制備 用移液器量取不同質(zhì)量濃度供試藥劑溶液，加入提前熔化好的 PDA 培養(yǎng)基，混勻后倒入培養(yǎng)皿中。用直徑5 mm打孔器從菌落邊緣切取菌塊，移接于含藥不同的PDA平板中央。以不含藥的培養(yǎng)基為對照，各處理重復3次，以上操作在無菌操作臺上進行。置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d 后觀測各處理菌落生長情況，十字交叉法測量菌落直徑[6]，計算抑菌率。

　　以供試藥劑濃度的對數(shù)值x為自變量，以抑菌率幾率轉(zhuǎn)換值y為因變量，求出各藥劑的毒力回歸方程，計算各藥劑對菌株的抑制中濃度(EC50)[7]。EC50<5 μg/mL為高度敏感;5 μg/mL≤EC50<20 μg/mL為中度敏感;EC50≥20 μg/mL為不敏感。

　　1.2.3 田間藥效試驗 依據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果，選擇對茶樹云紋葉枯病菌毒力較強6種藥劑進行田間藥效試驗。在信陽市�負憂�車云山茶場進行試驗，6月下旬和7月下旬各噴藥1次。采用工農(nóng)-18型背負式手動噴霧器進行噴霧，藥液均采用2次稀釋法配制，噴施藥液量750 L/hm2。試驗設45%咪酰胺EW為375 g/hm2、25%嘧菌酯SC為 150 g/hm2、80%多菌靈WP為675 g/hm2，15% 三唑酮為WP 60 g/hm2、25%苯醚甲環(huán)唑EC為 125 g/hm2、80%甲基托布津WP為 500 g/hm2、清水空白對照，共計7個處理。各處理間隨機排列，重復3次，各處理區(qū)面積為30 m2。防效調(diào)查：每個小區(qū)定點選取5株，每株隨機檢查中上部植株葉片20張，在施藥前和藥后14 d，分級調(diào)查病葉數(shù)、病斑面積，計算病葉率、病指及防效。云紋葉枯病病情指標參照高旭麗[8]方法，病情指數(shù)及防治效果計算公式如下：

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 8種殺菌劑對山茶刺盤孢的毒力

　　8種殺菌劑對山茶刺盤孢的毒力回歸方程、相關系數(shù)(r)、抑制中濃度(EC50)和95%置信限如表1所示。由表1可知，山茶刺盤孢對測定的8種藥劑均表現(xiàn)敏感，其EC50在0.092 4～11.331 5 μg/mL之間。其中嘧菌酯、咪鮮胺、多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、三唑酮和甲基托布津的EC50均小于5.0 μg/mL，表現(xiàn)為高度敏感。尤其是嘧菌酯、咪酰胺和多菌靈的敏感性最強，其EC50均小于0.5 μg/mL。百菌清和代森錳鋅為中度敏感(5 μg/mL≤EC50<20 μg/mL)。

　　2.2 田間藥效試驗

　　選擇對山茶刺盤孢高度敏感的6種藥劑進行田間藥效試驗，結(jié)果見表2。從表2可知，6種藥劑對茶樹云紋葉枯病均有一定的防效，但不同處理間存在差異。以45%咪酰胺EW的防效最好，達到91.32%;其次為20%嘧菌酯SC和80%多菌靈WP，其防效分別達到86.63%和80.55%。以上3種藥劑的防效都達到80%以上，其中20%嘧菌酯SC和80%多菌靈WP防效差異不顯著，但后者與45%咪酰胺EW防效差異顯著。15%三唑酮WP和25%苯醚甲環(huán)唑EC的防效分別為75.79%和73.85%，均超過70%，也有較好的防效。80%甲基托布津WP防效最低，為63.45%，顯著低于其他5種藥劑。

　　3 小結(jié)與討論

　　河南信陽地區(qū)的山茶刺盤孢(茶樹云紋葉枯病菌)對嘧菌酯、咪酰胺、多菌靈、三唑酮、苯醚甲環(huán)唑、甲基托布津表現(xiàn)高度敏感;對百菌清和代森錳鋅表現(xiàn)中度敏感。其中嘧菌酯、咪酰胺和多菌靈的抑制中濃度(EC50)均小于0.5 μg/mL，表現(xiàn)極強的敏感性;選擇其中表現(xiàn)高度敏感的6種藥劑進行田間藥效試驗，結(jié)果表明6種藥劑對茶樹云紋葉枯病均有一定防效。其中咪酰胺的防效最高，為91.32%，可考慮做為河南目前及今后防治茶樹云紋葉枯病的特效藥劑。嘧菌酯和多菌靈的田間防效較為理想，均達80%以上，也可做為防治該病的常規(guī)藥劑。三唑酮是一種內(nèi)吸性較強的三唑類殺菌劑，持效期長。苯醚甲環(huán)唑?qū)儆诒Ｗo和治療性殺菌劑。兩者的防效均在70%以上，也可作為防治茶樹云紋葉枯病的輪換藥劑使用。甲基托布津防效不理想，并顯著低于其他5種藥劑，其原因可能與其產(chǎn)品劑型、質(zhì)量及施藥濃度等有關，也可能是信陽地區(qū)在云紋葉枯病防治中長期、單一施用甲基托布津(調(diào)查中發(fā)現(xiàn))，使病菌產(chǎn)生了一定程度上的抗藥性。甲基托布津和多菌靈同為苯并咪唑類殺菌劑，其作用機理都是干擾真菌的細胞分裂[9，10]，兩者可產(chǎn)生交互抗性[11]，這在茶樹云紋葉枯病的防治上應當引起足夠的重視。

　　參考文獻：

　　[1] 王志坤，譚萬忠，張克誠，等.茶樹云紋葉枯病病原鑒定及其生物學特性研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學，2008(4)：67-69.

　　[2] 高旭暉，鄭高云，梁麗云，等.茶云紋葉枯病病原菌侵入與葉位關系研究[J].植物保護，2008，34(2)：76-79.

　　[3] 盧東升，王金平，謝正萍.豫南茶樹葉部真菌病害及病原鑒定[J].河南農(nóng)業(yè)科學，2008(8)：95-98.

　　[4] 龔 新，袁國強.信陽茶區(qū)茶葉生長的生態(tài)環(huán)境淺析[J].地域研究與開發(fā)，1998，17(4)：94-96.

　　[5] 袁國強，邱士可，劉荷芬.河南省信陽茶業(yè)可持續(xù)發(fā)展能力評價[J].河南農(nóng)業(yè)科學，2006 24(5)：768-770.

　　[6] 蘇 丹，傅俊范，周如軍.白頭翁葉斑病菌對7種殺菌劑的敏感性測定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2012，51(10)：2014-2015.

　　[7] 秦虎強，陳芳穎，付鼎程，等.油菜菌核病菌對10種殺菌劑的敏感性及不同藥劑田間防效[J].西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版)，2011，39(7)：117-112.

　　[8] 高旭麗.茶園病害調(diào)查方法的研究[J].茶業(yè)通報，1993(4)：25-26.

　　[9] 李 洋.遼寧葡萄炭疽病菌對多菌靈抗藥性研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學，2009.

　　[10] 徐漢虹.植物化學保護[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.