本文是一篇農藝師職稱論文，發表在《植物分類與資源學報》上，雜志是國家科委(79)國科發條字341號文批準創辦的植物學專業學報，是中國科學院主管的全國性自然科學期刊。本刊1979年創刊，現已成為我國植物科學研究發表論文的主要學術性刊物之一。本刊屬于中國生物學類科技核心期刊;中國自然科學核心期刊。主要刊登植物學各學科具有創新性或較高學術水平的原始論文和簡報;植物學領域的新發現及重大應用價值的新成果快報;結合本人工作，反映本學科重要領域的國內外最新研究進展的綜述等。

　　污染是在組織培養過程中培養基和培養材料滋生雜菌，導致培養失敗的現象。它是影響植物組織培養的一個重要因素，它通常會導致培養失敗造成很大的損失。

　　【摘　要】預防和控制污染是植物組織培養苗工廠化生產中重要的技術環節。本文CSCD期刊論文從通常污染的防控、內源性污染的防控、繼代培養中污染防控、改善培養基的成分等方面，分析了怎樣減少組織培養中出現的污染問題。從而達到降低生產成本;減少對植株造成傷害;減少接種源及污染的機率等目的。

　　【關鍵詞】植物組織培養,污染,預防控制,對策,農藝師職稱論文

　　組織培養中污染率的增加引起組培苗成本的提高，造成很大的經濟損失，并對植株造成傷害，增加接種源及污染機率。因此,組織培養中降低污染率是工廠化生產中不可忽視的技術環節。

　　一、污染的類型及原因

　　1.通常污染

　　主要是外植體消毒不徹底，無菌操作和培養過程中，如：培養基、接種工具、接種室消毒不嚴格或操作不規范而導致的污染。

　　2.內源性污染

　　內源菌包括真菌和細菌。在植物組織培養中，由于材料內部的內生菌不能被一般的表面消毒方法所清除，隨著材料進入培養過程，引起的污染稱為內生性污染或內源性污染。許多植物表面或大氣中生存的微生物，可經由植物自然的開口或傷口進入植物內部，而有一些兼性腐生菌或絕對寄生菌，可藉由載體或是擁有一些侵入的機制侵入植物內部，使植物感染病原菌。

　　二、污染所造成對組織培養生產的影響

　　污染不但造成人力、物力的浪費，而且降低了植株的生命活力;影響其繁殖系數減少增殖倍數;降低商品苗的品質。并且增加接種源及污染的機率 如真菌污染的滅菌不當會造成空氣污染，從而增加接種源污染的機率。

　　三、通常污染的防控對策

　　操作污染和環境污染指真菌污染和細菌污染。真菌污染主要來源于環境，細菌污染主要來源于接種材料及工具。此類污染可通過如下措施加以克服：

　　每次接種前應對接種室的地面進行清潔衛生工作，并用75%的酒精噴霧使空氣中的灰塵沉降，并用紫外燈照射20~30min。接種前工作臺面要用新潔爾滅或75%酒精擦洗,使用超凈工作臺對接種環境污染的控制更有成效。但它應置放在潔凈的房間，窗戶密封，并定期清洗過濾膜，以延長使用壽命。培養室的相對濕度應控制在70%左右，相對濕度太高可以用抽濕機除濕。接種結束后，應進行地面清潔衛生工作，即先打掃一遍，再用濕布擦過，并定期用甲醛熏蒸接種室。

　　金屬器械的滅菌：一般用火焰滅菌法，即把金屬器械放在95%的酒精中浸一下，然后放在火焰上灼燒滅菌。這一步在無菌操作中有要反復進行。

　　用莖尖作外植體時，要盡量選取帶菌少的材料，如果室外栽培的材料污染太嚴重，可先將植物樣本挖出，改為室內盆栽，噴布殺蟲劑和殺菌劑，不便移栽的，可套塑料袋，待長出新枝條后，再行采樣接種。對污染嚴重的外植體，可以在培養基中加入殺菌劑。也可在菌類長入組織內部時，除去韌皮組織，只接種內部的分生組織可防止材料帶菌。外植體消毒常用藥劑有：70 %～75%的酒精，0.3%~0.6%的次氯酸鈉溶液和0.1 %的升汞溶液等。選用何種滅菌劑和滅菌時間根據不同情況及操作者的經驗來掌握，既要求將外植體表面的微生物徹底殺死，又要求盡可能少傷害外植體組織和表層細胞。先用75%的酒精棉花擦拭外植體材料再使用消毒藥劑常能取得較好的消毒效果。

　　消毒鍋的壓力表降到零后不能馬上出鍋。因冷熱空氣作用的負壓效應，使外界環境的冷空氣倒吸入已滅菌好的培養瓶內引起真菌污染，為避免該現象的發生，消毒后培養瓶應留在鍋里，等冷卻后才出鍋。如果出現培養基造成的污染，就要及時地檢查滅菌鍋的性能或其他的問題。

　　四、內源性污染的防控對策

　　一般來說，溫室內盆栽的植株比室外栽培的植株含菌少，為了能更好的降低污染率，可把室外栽培變為室內盆栽。要求：盆栽用土應使用不含有機質及經消毒的清潔土壤，尤其是要采集地下材料時，須用經過消毒蛭石等作栽培基質;施用無機肥，并對植物噴灑殺蟲劑和殺菌劑。不便移栽的，可套塑料袋，待長出新枝條后，再采樣接種。

　　將田間采集的枝條用水沖洗干凈后插入無糖的培養液或自來水中，使其發枝，后以這種新抽的嫩枝作為外植體，可大大減少內源菌的污染。

　　相信隨著技術的日趨完善這些問題也會得到解決，就目前而言在污染的預防和控制上，無論是通常污染還是內源性污染都需要從外植體的選擇及消毒滅菌入手，盡可能的使材料不帶菌;再在各環節中采取相應的有效措施(如改進消毒方法，改善培養基的成分等。才能從根本上預防和控制污染，從而達到生產所需的目的。