隨著農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，玉米的種植和繁育技術(shù)也越來越先進(jìn)，尤其玉米的遺傳轉(zhuǎn)化，本文主要針對玉米成熟胚愈傷誘導(dǎo)進(jìn)行探討與分析。

　　《玉米科學(xué)》由吉林省科技廳主管，吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、國家玉米工程技術(shù)研究中心(吉林) 國家玉米改良中心、中國農(nóng)業(yè)科技東北創(chuàng)新中心合辦，著重報道有玉米科學(xué)等經(jīng)濟(jì)作物的研究報告、試驗(yàn)簡報、綜合評述、經(jīng)驗(yàn)交流、應(yīng)用技術(shù)、科技簡訊、信息研究及有關(guān)其他生物、綠色食品和環(huán)境保護(hù)等科技文章。

　　合適的受體材料是玉米成功轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵,本實(shí)驗(yàn)試圖通過成熟玉米來誘導(dǎo)愈傷,為轉(zhuǎn)化提供材料。選取生產(chǎn)上常用的幾個玉米系為材料,參考相關(guān)文獻(xiàn),摸索組織培養(yǎng)條件將成熟胚誘導(dǎo)愈傷,來獲得再生植株。

　　近年來,隨著基因工程技術(shù)的不斷深入,玉米的遺傳轉(zhuǎn)化也取得了一些進(jìn)步,合適的受體材料是玉米轉(zhuǎn)化成功的關(guān)鍵,所以必須對受體材料進(jìn)行鑒定和篩選,保證轉(zhuǎn)化后能夠得到可育的植株。

　　幼胚是玉米遺傳轉(zhuǎn)化中使用最多的外植體 [1,2]。但幼胚組織培養(yǎng)受基因型的控制[3],而且取材的時間受到嚴(yán)格的季節(jié)限制。能否通過成熟胚誘導(dǎo)愈傷獲得再生植株呢,Green等最早報道了玉米的成熟胚可誘導(dǎo)愈傷組織,但未能獲得再生植株。Wang[4]用玉米自交系A(chǔ)632,B73和Mo17的成熟胚誘導(dǎo)愈傷,使用的培養(yǎng)基為含有1~2毫克/升2,4-D的MS,愈傷組織誘導(dǎo)頻率為23%~100%,其中Mo17誘導(dǎo)頻率最高,并且B73和Mol7中有4%~5%的外植體得到了再生植株。Huang等[5]利用七個自交系材料進(jìn)行了成熟胚誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn),由成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織再生植株的效率達(dá)到了19.8%~32.4%。隨后Diaa等人[6]也將成熟胚縱切,用含2,4-D的LS培養(yǎng)基誘導(dǎo)出愈傷并獲得再生植株。

　　選取生產(chǎn)上常用的幾個玉米品系為材料,參考相關(guān)文獻(xiàn),摸索組織培養(yǎng)條件將成熟胚誘導(dǎo)愈傷,來獲得再生植株。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　供試材料為農(nóng)大108、X08、X090、Q319和X178,基本培養(yǎng)基為LS誘導(dǎo)培養(yǎng)基,N6培養(yǎng)基。

　　1.2 方法

　　用升汞將玉米成熟種子消毒,在無菌水中浸泡24小時后,在LS培養(yǎng)液中再浸泡48小時,然后轉(zhuǎn)到MS培養(yǎng)基上。待出芽后將芽切掉,將種子縱切,放到LS愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)。待長出愈傷后,將其轉(zhuǎn)到N6的分化培養(yǎng)基上,分化出幼苗。

　　2 結(jié)果與分析

　　五個玉米品系中均能長出愈傷,其中農(nóng)大108效果最好,具體情況見表1,但當(dāng)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上后,愈傷長勢變慢,顏色變褐。有的愈傷轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上之后,部分變綠,但不能分化,僅有農(nóng)大108的愈傷分化出幼苗。

　　3 結(jié)論

　　通過本實(shí)驗(yàn)的研究表明,玉米縱切后愈傷的誘導(dǎo)率明顯增加,但是分化出植株的比例很低,可能跟后期所用的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基有關(guān);該實(shí)驗(yàn)還表明基因型是影響愈傷誘導(dǎo)率的決定性因素, 基因型不同愈傷組織的誘導(dǎo)率和分化率都有很大的差異, 本實(shí)驗(yàn)中農(nóng)大108做為供試材料,誘導(dǎo)愈傷數(shù)量最多,同時也是唯一分化出幼苗的,供試材料中的X090是愈傷誘導(dǎo)率最低的,而且誘導(dǎo)出的愈傷很快褐化,不能再生。