所屬欄目:醫學校驗論文 發布日期:2013-12-09 14:34 熱度:
【摘 要】近年來,關于單胺氧化酶在臨床上的應用研究越來越受到人們的關注,本文將對其理化性質、檢測方法及臨床應用作一綜述。
【關鍵詞】單胺氧化酶,研究進展
1 MAO理化性質單胺氧化酶(Monoamine oxidase,MAO)的分類名為單胺:氧氧化還原酶,是含Fe2+、Cu2+和磷脂的結合酶,主要作用-CH2NH2基團催化各種單胺類脫胺生成相應的醛,然后進一步氧化成酸;或使醛轉化為醇再進一步代謝。MAO是一種上具多個結合部位的單一分子酶,故對底物的特異性不高,可使多種胺類氧化脫氨。MAO廣布于體內各組織器官,尤以肝、腎、胃和小腸含量最多,主要位于線粒體膜外表面,并與膜緊密結合,以黃素腺嘌呤二核苷酸為輔酶;另一類存在于結締組織,不含FAD,以磷酸吡哆醛為輔酶。
腦組織中的MAO隨年齡增加、神經膠質細胞的增多其活性增強。MAO能分解兒茶酚胺類激素,可間接反映心臟交感神經結功能。現已證實,不同來源的MAO的相對分子質量相差很大,小者約100,000,大者可達1,000,000以上,是由于同一亞基的聚合程度不同所致。
2 MAO實驗室檢測方法
最早檢測MAO是用熒光測定法[1]和醛偶氮萘酚法,目前常用方法包括以下幾種。
2.1 醛苯腙比色法 該方法通過MAO氧化芐胺,再與2,4二硝基苯肼作用生成的醛苯腙在堿性條件下產生棕紅色,于470nm比色測定,計算MAO的濃度。
2.2 MCDP比色法 該法是通過MAO氧化芐胺產生過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶存在下與MCDP作用生成有色的甲烯藍,于660nm處比色測定,計算MAO的濃度。此法需要加入終止液后測定,不宜于大批量標本的檢測,而且MCDP見光易分解。
2.3 連速監測法 該方法是通過MAO催化芐胺生成氨,氨在α-酮戊二酸、NADPH和GLDH的存在下生成谷氨酸,同時NADPH還原成NADP+,引起340nm處吸光度的下降,通過監測其下降的速率即可得出樣本中MAO的活性。此方法快捷、操作簡單、適合自動化分析,可減少人為誤差,具有良好的準確度與精密度,適合大多數臨床實驗室應用。
3 MAO測定的臨床應用
3.1 血清單胺氧化酶活性高低能反映肝纖維化的程度,是診斷肝硬化的重要指標。肝硬化病人MAO活性升高的陽性率在80%以上,最高值可達對照值的3.5倍(n=30)。酶活性與腹腔鏡所見肝表面的結節變化,以及與活組織鏡檢所見的纖維化程度相平行。纖維變僅限于匯管區或小葉中心者,其MAO活性大致正常;纖維變侵入肝實質內時,MAO升高率為30%;匯管和匯管區之間有架橋性纖維化時,則有83%升高;如在假小葉周圍有廣泛纖維化形成時,則幾乎全部均升高,且升高幅度最大。國內報道陽性率均在85%(天津公安醫院:17例,88%,高璣山等:32例,85.7%;薛德義等:71例,87.05%;黃澤倫:20例,85%;劉覽等:30例,86.7%),其升高幅度及陽性率均超過急性或慢性肝炎。同工酶分離證實,慢性肝病SMAO-III有增高趨勢;肝硬化代償組MAO-III占總活性的(23.9+3.0)%,其陽性率為72.2%(13/18);肝硬化失代償組MAO-III占總活性的(34.6+4.0)%,其陽性率為92.3%,故檢測MAO同工酶有助于肝硬化的早期診斷。
雖然肝硬化時,結締組織纖維釋放MAO增多,但在纖維化甚為明顯的血吸蟲肝病,患者SMAO并不一定升高,故纖維化并非MAO活性升高的唯一原因。現已知大動脈和肺組織內MAO的濃度比血清高100-150倍,血中MAO可能部分來自血管內皮細胞。肝硬化時,病人體內的水分增加,末梢擴張和高動力型循環等有可能促使血管壁內MAO釋放人血。由于胃腸組織也含有豐富的MAO,因此門-體靜脈短路時,腸內MAO可經短路進入體循環。
3.2 各型肝炎:各型肝炎急性期患者的MAO活性多數不升高,但在暴發型重癥肝炎時,因肝細胞壞死,線粒體釋放大量的MAO,可致MAO活性升高,陽性率可達73.3%,其升高幅度與病情輕重程度成正相關;急性肝炎經久不愈,病程超過3個月者,MAO活性亦可升高;活動型慢性肝炎有半數左右病例MAO活性升高。肝炎與肝硬化病人MAO活性差別顯著,而各型肝炎之間的MAO活性無顯著差異。
3.3 糖尿病可因合并脂肪肝,充血性心力衰竭可因肝郁而繼發肝纖維化,以至人MAO活性增高;甲狀腺功能亢進可因纖維組織分解與合成旺盛,肢端肥大癥可因纖維過度合成等原因,從而引起MAO活性不同程度的升高。有些無纖維增生的結締組織疾病的病人MAO活性不升高。原發性肝癌、繼發性肝癌、畸胎瘤、膽汁性肝硬化、血吸蟲性肝硬化、慢性膽汁郁積型肝炎等患者的SMAO活性不變。
測定血小板MAO活性發現,正常對照組女性大于男性。
慢性精神分裂癥患者血小板MAO活性明顯低于正常組,而急性精神分裂癥與對照組無明顯差別,但抗精神病藥物能引起MAO活性升高。雙向情感性障礙患者,血小板MAO活性顯著低于對照組,且男性低于女性;躁狂型患者顯著低于抑郁型患者患者,單相抑郁癥患者顯著公共開支對照組。但美國學者最近研究認為,血小板MAO活性與精神病學檢查結果沒有明顯關系。酒精中毒者男性血小板MAO與女性有明顯差異。
此外,測定腫瘤組織勻漿MAO和二胺氧化酶的活性,有助于區別前腸和中腸的類癌瘤腫瘤,前腸類癌腫組織中MAO活性[(1850+342)mol/mg.min,n=16]明顯高于中腸類癌腫瘤。
文章標題:淺析研究單胺氧化酶成份藥學論文范文
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