摘要目的觀察不同劑量的中藥紅花萃取物（HE）對腎性高血壓大鼠血液抗性炎性細胞因子白介素-10（IL-10）的水平的影響。方法選取2月齡健康Wistar大鼠隨機分為五組：假手術組（A組）、模型對照組（B組）、紅花高劑量組（C組）、紅花中劑量組（D組）和紅花低劑量組（E組），采用改良的兩腎一扎方法建立大鼠高血壓模型。分組灌胃給藥五周后，稱重處死動物，抽取血液，分離血清,﹣70℃保存備用，采用ELISA法測定血清IL-10的濃度。結果各組大鼠血清IL-10的濃度分別為101.29±7.59pg/ml(A)，95.91±5.69pg/ml(B)，95.31±6.22pg/ml(C)，95.49±5.53pg/ml(D)和95.55±5.22pg/ml(E)，各組之間統計學處理均無明顯差異（p>0.05）；結論腎性高血壓大鼠血清抗炎性細胞因子IL-10水平變化不大，中藥紅花萃取物無明顯升高抗炎性細胞因子IL-10的作用。
　　關鍵詞：高血壓；腎性；大鼠；IL-10；紅花萃取物；
　　高血壓病是臨床最常見的疾病之一，亦是動脈粥樣硬化、冠心病、腦血管疾病以及其他許多血管性疾病發生的最危險因素，近年來的研究表明炎性機制在高血壓的發生、發展及轉歸中也扮演著極其重要的角色，特別是促炎性細胞因子與高血壓的發生、發展存在密切的聯系，促炎性細胞因子如腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等不僅可引發高血壓和導致高血壓病人的胰島素抵抗［1］，而且與高血壓的其他并發癥如動脈硬化、心室肥厚、心功能減退以及血栓形成等的發生、發展密切相關［2］，而IL-10被認為是體內最重要的抗炎細胞因子，對炎癥反應的調控起非常重要的作用，既往的研究表明，而中藥紅花不僅具有降壓作用［3］，并有改善循環、抗血小板聚集、降低促炎性細胞因子水平等多種功能［4,5］，但其對抗炎性細胞因子IL-10的影響鮮有報道，本研究采用動物模型，觀察了紅花萃取物對腎性高血壓大鼠血液中的抗炎性細胞因子IL-10水平的影響，現報告如下。
　　1.實驗材料與方法
　　1.1材料與試劑
　　2月齡健康Wistar大鼠50只,♀♂兼用，體重160-180g,由煙臺綠葉制藥有限公司動物實驗室提供，普通飲食喂養。紅花萃取物由煙臺綠葉制藥有限公司提供；IL-10ELISA法檢測試劑盒（進口分裝）購自北京邦定泰克生物技術有限公司。
　　1.2.方法
　　1.2.1腎性高血壓模型建立取健康Wistar大鼠,術前禁食12h,自由飲水,測尾動脈壓,用3%戊巴比妥鈉(0.23ml/100g)行腹腔注射麻醉后,腹左側備皮,于左肋弓下緣0.5cm、脊柱前0.5cm處行1.5～2.0cm縱切口,逐層分離皮下組織,于左腎后上方用自制的玻璃分針分離腎動脈,在左右腎動脈分支之間的腹主動脈下穿入2.0手術縫線,沿血管走行方向放置7號注射針頭與腹主動脈一起結扎,然后小心拔出針頭,腹腔滴入青霉素(40萬U/ml)適量,逐層關腹、縫合，術后肌注青霉素10萬U。假手術組不結扎腹主動脈,其余同手術組。術后正常飲食,定時觀察體征。
　　1.2.2分組、給藥與取材將50只大鼠隨機分為假手術組（A組）10只，手術組40只，再將手術組大鼠隨機分為四組：模型對照組（B組），紅花高劑量組（C組）及紅花中劑量組（D組），以及紅花低劑量組（E組）各10只，五組大鼠按上述方法造模二周后，C組、D組及E組大鼠分別予以紅花萃取物80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg灌胃，每日一次，而A組和B組大鼠予以等量飲用水，給藥總時程為五周。給藥結束后，處死動物，腹主動脈取血，高速離心后分離血清，零下70℃保存備用。
　　2.檢測方法與統計學處理
　　采用ELISA法測定血清IL-10的濃度，各項指標均用±S表示,兩組間比較用ｔ檢驗，所有數據均輸入SPSS10.0統計軟件進行統計分析，p<0.05為統計學差別有顯著性意義。
　　3.結果
　　實驗結束后，各組大鼠血清IL-10濃度變化的情況（見表1）。
　　表1卡托普利及紅花萃取物對大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α濃度的影響（±S）
　　
　　注：△與假手術組相比，p>0.05;﹡與模型對照組相比，p>0.05;
　　結果顯示，各組之間相互比較，IL-10的血清濃度變化不大，統計學差異無顯著性。
　　4.討論
　　IL-10是最初是由Fiorentino在1989年發現的鼠輔助T細胞Th2亞型細胞分泌的一種細胞因子，能抑制巨噬細胞活化及繼發的細胞免疫反應,對單核/巨噬細胞的細胞因子的合成和功能有廣泛的抑制作用,具有抑制單核/巨噬細胞產生TNF-α、IL-6、白介素-1α（IL-1α）、白介素-1β（IL-1β）等促炎性細胞因子、抑制核因子-κB（NF-κB）和Ras等信號傳導通路、上調體內細胞因子拮抗劑IL-1RA等多種作用［6］。體外研究表明，抗炎性細胞因子IL-10具有對抗促炎性細胞因子、抗細胞凋亡以及抗平滑肌細胞增殖等有利于高血壓治療的作用［7］，提高其循環中的濃度也是高血壓抗炎干預的一個靶點，張永和等人在多發性創傷的研究中顯示IL-10的循環水平于損傷后第1天開始升高,至第5天達到高峰,2周后仍高于正常對照組，其水平升高程度與促炎性細胞因子TNF-α、IL-6的水平呈正相關，監測其變化有利于創傷程度的判斷具有顯著的臨床意義［8］。本研究顯示在腎性高血壓大鼠循環中IL-10的水平變化不大，其機制有待于進一步研究，可能與觀察時間長（七周）有關。
　　紅花為傳統的中藥之一，具有良好的活血通經、化瘀止痛的功能，其萃取物的主要水溶性成分為紅花黃色素，是多種查耳酮類化合物的混合物，具有擴張血管、降低血壓、改善血粘度、抗血小板聚集等多種功能［9］。細胞凋亡是高血壓左室重構的重要機制之一，有研究顯示其能夠顯著降低BAX、提高Bcl-2在心肌組織內的表達，可防止心肌細胞的凋亡，并可明顯降低循環中的促炎性細胞因子TNF-α、IL-6的濃度［10］，這些特性對預防及延緩高血壓的并發癥的發生發展具有重要的作用，盡管IL-10是體內最重要的抗炎細胞因子，本研究顯示在腎性高血壓時，不同劑量的紅花萃取物對IL-10循環的水平均無明顯影響，顯示了紅花提取物可能主要是通過抑制促炎性機制的活性而在高血壓的治療中發揮重要的作用。
　　5.參考文獻
　　1．尤巧英.部分炎癥因子與胰島素抵抗［J］.國外醫學內分泌學分冊，2004,24(3):183-186。
　　2．余琴，李新，趙翠花.原發性高血壓病患者細胞因子水平與左心功能的相關分析［J］.中國心血管病研究雜志，2004，2(3):187-189。
　　3．楊蕾，張志云，李云鵬等．紅花提取物對自發性高血壓大鼠血壓影響的實驗研究［J］.河北中醫藥學報，2004，19(3)：26-29。
　　4．樸永哲，金鳴．紅花抗心肌缺血研究進展［J］.中草藥，2001，32（5）：473-475。
　　5．劉素云,張輝,李擁軍等.紅花注射液對冠心病介入治療中缺血心肌保護作用及機制［J］.河北中醫藥學報,2004,19(3):29-31。
　　6．呂欣，李泉，俞衛鋒.IL-10與全身炎癥反應綜合征［J］.國外醫學.麻醉學與復蘇分冊，2002，23(4):224-227。
　　7．歐陽平，楊紅，彭立勝等.白介素-10對TNF-α介導血管平滑肌細胞增殖的影響［J］.中山大學學報（自然科學版），2002，41(1):76-78。
　　8．張永河，趙寧，宋祖軍．多發性創傷后血清TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10變化的連續觀察［J］.中國急救醫學2002，22（3）：143-144。
　　9.楊志福，梅其炳，蔣永培.紅花有效成分及藥理作用［J］.西北藥學雜志，2001，16（3）：131-133。
　　10.明章銀,蔣建剛,劉復興等．紅花注射液對大鼠缺血再灌注心肌組織Bcl-2和Bax基因表達的影響［J］.咸寧醫學院學報，2002，16（2）：81-84。