[摘要] 目的 觀察天麻細粉片在實驗動物中的毒性和安全性。 方法 急性毒性試驗采用昆明種小鼠和SD大鼠各20只，雌雄各半，天麻細粉片劑量為15.0 g/kg體重，觀察14 d，記錄中毒表現。Ames試驗采用了菌株TA97、TA98、TA100和TA102，在加S9與不加S9的條件下加入天麻細粉片，劑量分別為8、40、200、1000、5000 μg/皿。小鼠骨髓細胞微核試驗和精子畸變試驗均采用昆明種小鼠，天麻細粉片劑量為1.25、2.50、5.00 g/kg體重，用環磷酰胺40 mg/kg體重為陽性對照。30 d喂養試驗采用SD大鼠，雌、雄各40只，天麻細粉片劑量為2.81、5.62、11.25 g/kg體重，連續給予30 d，觀察動物一般狀況和體重，測定血液學及血液生化學指標、臟器系數，并進行組織病理學檢查。 結果 急性毒性試驗結果顯示天麻細粉片在小鼠和大鼠中的最大耐受劑量(MTD)均>15.0 g/kg體重，屬無毒級。天麻細粉片的Ames試驗、小鼠骨髓細胞微核試驗和精子畸變試驗結果均為陰性。30 d喂養試驗顯示動物一般狀況良好，各劑量天麻細粉片對動物的體重、進食量、食物利用率以及臟器重量和臟器系數均無明顯影響，對動物的血常規和血清生化指標也無明顯影響。病理檢查顯示高劑量天麻細粉片對動物的肝、腎、胃腸、脾、卵巢(睪丸)等組織無明顯毒性。 結論 本實驗條件下天麻細粉片未見明顯毒性或致畸和致突變作用。

　　[關鍵詞]藥學論文發表, 天麻細粉片,毒性,安全性

　　天麻(Gastrodia elata)為蘭科植物，《中國藥典》記載，天麻味甘，性微濕，入肝經，具有平肝熄風，祛風定驚的功效。天麻中含有多種成分，如天麻素(gastrodin)、香莢蘭醛(vanilline)、香莢蘭醇(vanillyl alcohol)、維生素A類、對羥基苯甲醛(P-hydroxybenzaldehyde)、對羥基苯甲醇(P-hydroxybenzyl alcohol)、琥珀酸(succinic acid)、胡蘿卜苷、谷甾醇、枸櫞酸、抗真菌蛋白和許多微量元素如鐵、氟、錳、鋅、碘等[1-2]。有研究表明，天麻粉及天麻細粉制成的片劑具有降血脂、降膽固醇、降低密度脂蛋白、降血糖等作用[3-6]。有報道表明，天麻粉在脂肪乳劑灌胃的大鼠中具有顯著的降血脂、減少肝臟脂肪蓄積、減輕肝臟脂肪變性及改善肝功能的作用[6]。但天麻細粉片劑型的毒理學實驗研究未見報道，本文針對天麻細粉片進行毒性及安全性評價的實驗研究。

　　1 材料與方法[7]

　　1.1 樣品

　　天麻細粉片由北京永康格林科技有限公司提供，批號090720，0.75 g/片[5]。

　　1.2 急性毒性試驗

　　昆明種小鼠(合格證號：0157223，體重18～22 g)和SD大鼠(合格證號：0157222，體重180～220 g)均由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，雌雄各10只，SPF級。實驗動物房許可證號：SYXK(豫)2007-0008，屏障環境。實驗方法為最大耐受劑量(MTD)法，天麻細粉片劑量為15.0 g/kg體重。具體試驗方法參考文獻報道[8]。觀察周期為14 d，期間記錄各組動物的中毒表現或死亡時間。

　　1.3 Ames試驗

　　菌株TA97、TA98、TA100和TA102由天津市疾控中心提供，S9活化系統由河南省疾病預防控制中心毒理室制備，具體試驗方法均參考文獻報道[8]。劑量選擇：天麻細粉片分為5個劑量組，分別為8、40、200、1000、5000 μg/皿。陽性對照分別為3-硝基9-芴酮、甲基甲烷磺酸酯、2-氨基芴或1，8-二羥基蒽醌[8]，均購自Sigma-Aldrich公司。本試驗在加S9與不加S9的條件下均各重復2次，每次3個平行板。

　　1.4 骨髓細胞微核試驗

　　采用昆明種小鼠(合格證號：0157223，體重25～30 g)，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，SPF級，雌雄各25只。具體試驗方法參考文獻報道[8]，小鼠分為5個組，即溶劑對照組、天麻細粉片3個劑量組(分別為1.25、2.50、5.00 g/kg體重)和陽性對照組(環磷酰胺40 mg/kg體重，由南通精華制藥有限公司提供，批號H32020796)。

　　1.5 小鼠精子畸變試驗

　　采用昆明種小鼠(合格證號：0157223，體重25～35 g)，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，雄性38只，SPF級。具體試驗方法參考文獻報道[8]。天麻細粉片和環磷酰胺(由南通精華制藥有限公司提供，批號H32020796)劑量同骨髓細胞微核試驗。

　　1.6 30 d喂養試驗

　　1.6.1 動物 采用SD大鼠(合格證號：0157222)，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，SPF級，雌、雄各40只，分別按體重隨機分為4組，每組10只。

　　1.6.2 劑量 天麻細粉片分低、中、高3個劑量組，分別為人體推薦量[5]的25、50、100倍，即2.81、5.62、11.25 g/kg體重。受試物采用摻入飼料法給予，用去除輔料乳糖、預膠化淀粉、硬脂酸鎂的樣品作為受試物(相當于去除50%輔料)。分別稱取受試物98.44、196.88、393.75 g，酪蛋白(北京維通利華實驗動物技術有限公司提供)19.69、39.38、78.75 g加粉飼料至7 kg混勻即成低、中、高3種不同樣品含量的飼料，連續給予30 d。

　　1.6.3 觀察指標 分別觀察動物的一般狀況、生長發育指標、血液學及血液生化學檢查、臟器系數，并進行病理組織學檢查，具體試驗方法均參考文獻報道[8]。 　　1.7 統計學分析

　　采用SPSS 11.0統計軟件進行數據分析，計量資料采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

　　2 結果

　　2.1 急性毒性試驗

　　天麻細粉片對小鼠和大鼠的急性毒性試驗結果見表1。雌、雄小鼠和大鼠經天麻細粉片空腹灌胃后觀察14 d均未見中毒癥狀，無死亡。本試驗中天麻細粉片經口急性毒性試驗的MTD>15.0 g/kg體重，屬無毒級。

　　2.2 Ames試驗

　　Ames試驗的結果見表2，陽性對照組在加S9或不加S9條件下均導致回復突變菌落數明顯增加，與空白對照組比較，差異有統計學意義(P<0.01);天麻細粉片各劑量組在加S9或不加S9條件下均未引起回復突變菌落數增加，與空白對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，提示天麻細粉片Ames試驗結果為陰性。

　　2.3 小鼠骨髓細胞微核試驗

　　環磷酰胺導致小鼠骨髓細胞微核率顯著增加(P<0.01)，天麻細粉片各劑量組微核率與溶劑對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)(表3)，提示天麻細粉片小鼠骨髓細胞微核試驗陰性。

　　2.4 小鼠精子畸變試驗

　　環磷酰胺處理小鼠后精子畸形率顯著增加，與溶劑對照組比較，差異有統計學意義(P<0.01);天麻細粉片各劑量組精子畸形率未見明顯變化，與溶劑對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)(表4)，提示天麻細粉片小鼠精子畸變試驗陰性。

　　2.5 30 d喂養試驗

　　2.5.1 動物一般狀況 試驗期間各組動物的一般狀況未見明顯異常。

　　2.5.2 天麻細粉片對大鼠體重、進食量和臟器系數的影響 試驗期間各劑量天麻細粉片對動物的體重未造成明顯影響，與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。各劑量天麻細粉片對動物的進食量、食物利用率以及肝、腎、脾、性腺等臟器的重量和系數無明顯影響(數據未顯示)(表5)。

　　2.5.3 血液學和血清生化檢查結果 各劑量天麻細粉片對動物的血常規指標以及血清生化指標無明顯影響(表6)。

　　2.5.4 病理組織學檢查 各劑量天麻細粉片給藥后肉眼觀察動物臟器顏色、形狀、大小等均未見明顯病變。病理檢查標本為對照組和天麻細粉片高劑量組的肝、腎、胃、腸、脾、卵巢(睪丸)。標本系甲醛固定，經水洗、修塊、脫水、石蠟包埋、切片、HE染色。結果(表7)顯示，對照組20只大鼠中有2例動物肝小葉有少量炎性細胞浸潤，1例動物肝臟匯管區有少量炎性細胞浸潤;天麻細粉片高劑量組20只大鼠中有2例動物肝臟匯管區有少量炎性細胞浸潤;其他臟器均未觀察到明顯病理改變。高劑量天麻細粉片對動物的肝、腎、胃腸、脾、卵巢(睪丸)等組織無明顯毒性。

　　3 討論

　　天麻作為天然藥物在我國已有超過一千年的應用歷史。目前，天麻及其制劑在臨床上主要用于治療神經系統疾病如癲癇、眩暈等[9]。此外，天麻還具有代謝調節[3-6]、抗炎[10-11]和抗血小板聚集[12]等藥理作用，具有廣闊的臨床應用前景。盡管大部分報道顯示天麻安全性好，毒副作用小[3-6]，但對其片劑進行系統性的毒理學研究尚未見報道。

　　本文實驗結果顯示，天麻細粉片在小鼠和大鼠中的口服MTD>15.0 g/kg體重，屬無毒級。天麻細粉片的Ames試驗、骨髓細胞微核試驗及小鼠精子畸變試驗結果均為陰性，提示無致畸和致突變的作用。大鼠30 d喂養試驗顯示天麻細粉片在雌、雄大鼠中劑量為11.25 g/kg體重(相當于人體推薦量的100倍)時對血液學和組織器官病理學檢測指標無明顯影響。

　　有關天麻制成的其他劑型的毒性研究也有報道。如天麻軟膠囊的毒性研究顯示[13]，對小鼠經口MTD>15.0 g/kg體重，大鼠30 d喂養試驗未觀察到中毒表現，給藥組動物的體重、食物利用率、血液學和血液生化等指標值、各臟器的臟/體比值與空白對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。天麻鎮眩顆粒毒理學實驗研究顯示，其在小鼠中的MTD>140 g/kg體重，且長期連續口服給藥安全[14]。SD大鼠連續30 d給予天麻藥材粉5.845 g/kg體重未觀察到有害作用[15]。妊娠期SD大鼠給予天麻藥材粉6.16 g/kg體重對胚胎及胎仔發育無明顯毒性作用[16]。

　　綜上所述，本研究為天麻片劑的臨床應用提供了安全性數據，結合本實驗研究與文獻報道[13-16]，天麻制劑無論是片劑、膠囊還是粉劑，在動物中均未觀察到明顯毒副作用以及致畸和致突變作用。由于動物實驗中天麻的劑量遠高于人體推薦量，提示天麻在臨床推薦劑量下應用安全可靠。

　　[參考文獻]

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