本文是醫學期刊投稿論文，探討天仙子提取物的急性毒性、抗炎及鎮痛作用。發表在《中華普通外科雜志》上，雜志主管單位是中國科學技術協會、主辦單位是中華醫學會，由北京大學人民醫院承辦。 本刊是中華外科學會會刊，面向廣大高中級普通外科醫師、外科各專業中青年醫師、大專醫學院校教師、科研人員、大學生、研究生等。涵蓋普通外科各個專業，包括肝、膽、胰腺、門靜脈、高壓癥及脾臟外科、胃腸道外科、腹腔鏡外科、血管外科、感染及危重癥外科、腹壁疝外科、乳腺、甲狀腺及內分泌外科、外科營養及實驗外科及局部解剖及外科學術學等等。

　　【摘要】 方法：以最大濃度最大給藥量用于小鼠，驗證其急性毒性，測定最大耐受量(MTD);以小鼠熱板法、小鼠扭體法觀察其鎮痛作用;以二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察其抗炎作用。結果：急性毒性試驗測定小鼠對該藥的最大耐受量(MTD)為200g·ml-1，相當于人日常用量的8333倍;實驗數據經t檢驗統計，表明天仙子具有鎮痛作用，也可以明顯抑制炎癥反應。結論：天仙子對小鼠的毒性很小，并且具有良好的鎮痛、抗炎作用。

　　【關鍵詞】 天仙子,急性毒性試驗,最大耐受量,抗炎,鎮痛,醫學期刊投稿論文

　　天仙子(Semen Hyoscyami)為茄科植物莨菪Hyoscyamus niger L.的干燥成熟種子，原稱“莨菪子”，又稱“橫唐”。味辛，性溫，有大毒，為非常用中藥，始見于《神農本草經》，歸心、胃、肝經。具有解痙止痛，安神定喘之效，用于胃痙攣疼痛，喘咳，癲狂等癥[1]。現代臨床常用于抗癌制劑中，由于癌證患者多伴有疼痛癥狀，而且傳統功效亦有止痛作用，故對其鎮痛作用進行研究。又因其有定喘功效，呼吸系統疾病常伴有炎癥發生，推斷該藥材應具有一定的抗炎作用，故本實驗對其急性毒性和鎮痛、抗炎的藥理作用進行觀察，為進一步研究開發該藥材提供科學依據。

　　1 材料

　　1.1 藥品和試劑 天仙子藥材于2007年3月購于安徽藥材市場，經藥典方法鑒定為正品。樣品溶液的制備：將100g藥材加8倍量水煎煮3次，每次0.5小時，合并濾液，濃縮到所需濃度。去痛片：錦州九泰藥業有限責任公司產品，批號H21020013。頭孢氨芐：沈陽奧吉娜藥業有限公司產品，批號H21023727。冰醋酸(分析純)：上海佘山化工廠，批號950710。二甲苯(分析純)：武漢有機合成化工廠，批號940826。

　　1.2 實驗動物 昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半，以上實驗動物均由大連醫科大學實驗動物學部提供。

　　1.3 儀器 AT201型電子分析天平，上海精密科學儀器有限公司;GJ-8402型熱板測痛儀(電壓220V，功率150W，溫度55±0.2℃)，浙江寧海白石電子醫藥儀器廠產品。

　　2 實驗方法

　　2.1 急性毒性試驗[2] 動物預試驗結果表明無法測出半數致死量(LD50)。依據陳奇的《中藥藥理研究方法學》，對受試藥物進行最大耐受量(MTD)的測定。取小鼠20只，雌雄各半，隨機分為2組，每組10只。以天仙子最大濃度水煎液按0.4ml·10g-1一次性給小鼠灌胃后即對動物體重、精神狀態、毛色、自主活動、呼吸、飲食、二便、口鼻分泌物等一般狀況進行觀察，連續觀察7天并記錄觀察結果。

　　2.2 鎮痛作用試驗

　　2.2.1 熱板法[2] 將預選合格的小鼠作正式實驗，將熱板測痛儀調節至55℃，將雌性小鼠置于熱板上，以雌小鼠口舔后足為準，連續測量痛閾值3次，每兩次間隔5分鐘，取其平均值為基礎痛閾，篩選基礎痛閾在5～30s的雌小鼠50只，隨機分為5組，每組10只，依次為生理鹽水組、陽性對照組、天仙子水煎液低、中、高劑量組，分別灌胃等容量生理鹽水，去痛片0.365g/(kg·d)和天仙子水煎液0.3g·(kg·d)-1、0.6g·(kg·d)-1、0.9g·(kg·d)-1，每日1次，連續7日，于末次給藥后不同時間測定并記錄各小鼠痛閾值，計算各組小鼠痛閾提高率。

　　痛閾提高率(%)=(給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值)/給藥前平均痛閾值×100%

　　2.2.2 小鼠扭體法[2] 取雌鼠50只，分組及用藥同2.1.1。末次給藥后30分鐘，分別給各組小鼠腹腔內注射新鮮配制的(0.5%)冰醋酸溶液0.2ml。以小鼠腹部內凹、伸展后肢、臀部抬高為準，記錄各組小鼠出現扭體反應的時間及15分鐘內各鼠扭體次數。將給藥組與生理鹽水組作比較，并計算各藥物組的扭體反應抑制率。

　　扭體反應抑制率(%)=(空白組平均扭體次數-給藥組平均扭體次數)÷空白組平均扭體次數×100%

　　2.3 抗炎作用試驗

　　2.3.1 小鼠耳廓腫脹法[2、3] 取小鼠50只，雌雄不限，分組及用藥同2.1.1。連續給藥7天，每天1次，末次給藥后30分鐘，將0.03ml對二甲苯涂于各小鼠右耳兩面致炎，致炎后1小時處死小鼠，以8mm打孔器在小鼠左右耳廓相同部位打下耳片，電子分析天平稱重，左右耳片重量之差即為腫脹度。將給藥組與生理鹽水組作比較，并計算各藥物組的耳廓腫脹抑制率。

　　耳廓腫脹抑制率(%)=(空白組耳廓腫脹度均值-給藥組耳廓腫脹度均值)÷空白組耳廓腫脹度均值×100%

　　2.4 統計方法 采用SPSS11.0軟件將各試驗組數據進行統計，試驗數據用x±s表示。

　　3 結果

　　3.1 急性毒性實驗結果 動物在給藥后均表現為活動明顯減少，靜臥不動，閉目，對刺激的反應性減弱，低頭，呼吸稍慢，各組小鼠均出現以上不同程度的中毒表現。給藥10h后恢復常態，開始進食。觀察7天后仍無死亡，便以頸椎脫位法處死動物，并對所有動物進行肉眼尸檢，亦未發現異常。小鼠口服天仙子水煎液最大耐受量是200g·kg-1，相當于臨床用量的8333倍。

　　3.2 對小鼠不同痛反應的影響

　　3.2.1 對熱板反應的影響 陽性對照組、天仙子水煎液低、中、高劑量組各小鼠，給藥后平均痛閾值均較給藥前顯著提高(P<0.05)，其痛閾提高率分別為46.85%、27.52%、32.50%、38.93%，且給藥后各組與生理鹽水組比較，痛閾值亦顯著提高(P<0.05)，表明藥物對熱刺激致小鼠疼痛具有明顯鎮痛作用(見表1)。表1 各組對熱板法致小鼠疼痛的影響(注：與給藥前比較，△P<0.05，▲P<0.001。

　　3.2.2 對扭體反應的影響 陽性對照組、天仙子水煎液低、中、高劑量各組小鼠，15min內扭體次數均較生理鹽水組顯著減少(P<0.05)，其扭體反應抑制率分別為34.25%、14.16%、23.74%、31.05%，表明藥物對冰醋酸致小鼠腹痛具有明顯鎮痛作用(見表2)。表2 各組對冰醋酸致小鼠腹痛的影響注：與生理鹽水組比較，△P<0.05，▲P<0.001。

　　3.3 對動物炎癥反應的影響 陽性對照組、天仙子水煎液低、中、高劑量各組小鼠，耳廓腫脹度均較生理鹽水組明顯減輕(P<0.01)，其腫脹抑制率分別為46.02%、17.72%、24.55%、38.21%，表明藥物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹具有明顯抑制作用，見表3。表3 各組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響注：與生理鹽水組比較，△P<0.05，▲P<0.001。

　　4 討論

　　以上藥理試驗表明，天仙子水煎液具有較明顯的鎮痛、抗炎作用，對不同的致痛、致炎模型顯示了對抗作用，對其傳統功效提供了一定的現代科學解釋依據。同時亦觀察到，其鎮痛和抗炎作用均以高劑量為優，呈明顯的量效關系。急性毒性試驗表明，給小鼠灌胃后引起不同程度的急性毒性反應，但10h后毒性反應現象消失，說明該藥對小鼠毒性較小。天仙子含阿托品0.06%～0.2%、莨菪堿0.02%～0.2%，東莨菪堿、莨菪胺0.01%～0.08%，阿托品的作用機制是競爭性拮抗Ach或擬膽堿對M膽堿受體的刺激作用，小劑量阿托品就能阻斷Ach或擬膽堿藥與M受體結合從而拮抗其作用，大劑量會造成毒性反應，而東莨菪堿中樞鎮痛及抑制腺體分泌作用強于阿托品，其外周抗膽堿作用和阿托品相似。所以，天仙子含有的有效成分用量大便會產生毒性。本試驗所采用的動物為嚙齒類動物小白鼠，對天仙子藥物毒性反應不夠明顯，其作用機制有待于進一步深入研究。

　　【參考文獻】

　　[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2005年版(一部)[S].北京：化學工業出版社，2005：37.

　　[2] 陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京：人民衛生出版社，1993：305.

　　[3] 洪佳璇.消喘煎鎮咳、平喘、抗炎作用的實驗研究[J].中國中藥雜志，2006，31(2)：169～172.