【摘要】綜述了丹參有效成分的各種提取分離技術(shù)，其中包括超臨界流體萃取技術(shù)、微波輔助萃取法、加壓液體萃取法、高速逆流色譜法和真空液相層析法等，并分別對其優(yōu)缺點進行分析，為丹參藥理學(xué)活性物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供參考。
　　【關(guān)鍵詞】丹參論文;有效成分論文;提取分離論文
　　丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，歷代本草均有收載。其味苦、性微寒，歸心、肝二經(jīng)。具祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效，是一種臨床應(yīng)用廣泛的藥學(xué)。其現(xiàn)代藥理作用主要包括舒張冠脈、增加冠脈血流量，具有明顯的鈣拮抗劑作用;提高心室的順應(yīng)性，改善心臟的舒張功能，對缺血心肌和再灌注心臟具有保護作用;抑制內(nèi)源性膽固醇的合成;增加微循環(huán)流速和流量，消除局部靜脈血液瘀滯，改善組織細(xì)胞缺血、缺氧所致的代謝障礙;具有抗體外血栓形成、抗血小板聚集、抗內(nèi)外凝血系統(tǒng)功能、減少血小板、促進纖維蛋白原降解作用;具有很強的清除自由基和抗氧化作用等[1]。隨著人類疾病譜的變化，丹參作為能夠預(yù)防和治療人類面臨的幾大危險疾病的植物藥之一，它的應(yīng)用將會更加廣泛論文。
　　近年來，丹參的臨床療效備受關(guān)注，因此，丹參有效成分的提取分離成為一個研究熱點。隨著提取分離技術(shù)的發(fā)展，研究丹參有效成分的手段呈現(xiàn)出多樣化，如超臨界流體萃取技術(shù)(supercriticalfluidextraction，SFE)、微波輔助萃取法(microwave-assistedextraction，MAE)、加壓液體萃取法(pressurizedliquidextraction，PLE)、高速逆流色譜法(high-speedcounter-currentchromatography，HSCCC)和真空液相層析法(vacuumliquidchromatography，VLC)等。通過查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻[中華論文網(wǎng)(www.zclw.net)歡迎您！]，本文對丹參有效成分的提取分離方法進行綜述論文。
　　1丹參有效成分的演變論文
　　20世紀(jì)30～60年代，丹參有效成分的研究重點為脂溶性成分。1979年姚俊嚴(yán)等從丹參中分離出原兒茶醛，從而把研究重點轉(zhuǎn)移到水溶性成分。20世紀(jì)80年代后期至90年代，人們在分離丹參水溶性酚酸成分時，發(fā)現(xiàn)丹參的主要活性成分為水溶性酚酸。
　　丹參的化學(xué)成分復(fù)雜，其中包括①二萜醌類，如丹參酮I，IIA，IIB、異丹參酮I，II、隱丹參酮、異隱丹參酮、二氫丹參酮I、二氫異丹參酮I等;②酚酸類，如丹酚酸A—K、原兒茶醛、丹參素、熊果酸、異阿魏酸等;③其它成分，如黃芩苷、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、氨基酸、無機元素等。丹參有效成分通常被歸為兩大類：脂溶性成分和水溶性成分。目前，丹參脂溶性成分以丹參酮為有效成分參考指標(biāo);水溶性成分以丹酚酸B、原兒茶醛、丹參素為有效成分參考指標(biāo)[2]。
　　2丹參有效成分的提取分離論文
　　丹參有效成分包括脂溶性成分和水溶性成分，因此提取分離工藝分為脂溶性成分二萜醌類的提取分離和水溶性成分酚酸類的提取分離。近年來，對于丹參有效成分提取分離方面的研究較多，主要涉及到：總有效成分的提取分離、二萜醌類的提取分離和酚酸類的提取分離。筆者分析了各種提取分離法的優(yōu)缺點，為丹參有效成分的提取分離及丹參藥理學(xué)活性物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供參考。
　　2.1總有效成分的提取分離丹參的有效成分復(fù)雜，總有效成分的提取率較低。主要的提取方法有醇提法[3]、超聲法[4]、CO2超臨界萃取法(SFE)[5]。梯度滲漉法具有濃度梯度大，浸出效果好，溶劑用量少，適合于有效成分含量低的藥學(xué)材提取等優(yōu)點。劉楊等[6]通過比較回流法、一般滲漉法和梯度滲漉法3種提取工藝對丹參有效成分提取率的影響，得出最佳工藝為梯度滲漉法。當(dāng)二氧化碳處于臨界狀態(tài)(溫度31.26℃，壓力72.9atm)以上時，即為超臨界流體。張玉祥等[7]通過對多種提取工藝(傳統(tǒng)水煎法、乙醇回流法、超聲波法、超臨界萃取法)的比較，得出CO2超臨界流體萃取法提取具有較高的提取率。這是由于傳統(tǒng)方法多數(shù)都有加熱過程或產(chǎn)熱過程，而超臨界萃取法受熱小，并且同時具有液體溶劑的溶解能力和氣體的傳遞特性，萃取后溶質(zhì)和溶劑易于分離等優(yōu)點，特別適合于熱敏性、易氧化物質(zhì)的分離或提純。而丹參酮ⅡA對光不穩(wěn)定，丹酚酸B受熱易分解，這就是傳統(tǒng)提取方法的提取率較超臨界萃取法提取率低的原因。
　　2.2二萜醌類成分的提取分離二萜醌類，又稱丹參酮，主要包括丹參酮ⅡA、異丹參酮、隱丹參酮和二氫丹參酮等。丹參酮在臨床上的應(yīng)用較早，對其提取分離的研究也較為深入。其提取方法主要有醇提法[8]，超聲提取法[9]，CO2超臨界流體萃取法[10]，微波輔助萃取法(MAE)，加壓液體萃取法(PLE);分離的方法有高速逆流色譜法(HSCCC)，柱層析和真空液相層析法(VLC)。
　　趙小亮等[11]歸納了丹參有效成分丹參酮的各種傳統(tǒng)提取方法，比較了傳統(tǒng)提取方法與CO2超臨界流體萃取法(SFE)各自的優(yōu)缺點，得出SFE法提取率較高，可用于丹參酮的提取。MAE法是利用微波能所產(chǎn)生的破壁效應(yīng)，使植物細(xì)胞內(nèi)的活性成分較完全的釋放出來，然后利用固相萃取法，也稱液—固萃取法，將保留在吸附劑上的樣品根據(jù)選擇性吸附與選擇性洗脫的過程差異，先用適當(dāng)溶劑系統(tǒng)洗去雜質(zhì)，然后再在一定條件下選用不同極性的溶劑，將目標(biāo)成分洗脫下來，達(dá)到分離凈化和富集的目的。微波輔助萃取法(MAE)可以在室溫下操作，避免了高溫帶來的損失，并且時間短，因此具有提取時間短，效率高和有機溶劑用量少的優(yōu)點。Pan等[12]對MAE法與傳統(tǒng)方法提取丹參酮進行了比較，丹參酮IIA、隱丹參酮和丹參酮I的提取率分別為0.29%，0.23%和0.11%，結(jié)果是MAE法較傳統(tǒng)方法優(yōu)越，也適合大規(guī)模的提取。其最佳提取工藝為乙醇濃度為95%，微波輔助萃取2min，液—固比例為10∶1(ml/g)。加壓液體萃取法(PLE)采用常規(guī)溶劑，在較高的溫度(50～200℃)和壓力(10.3～20.6MPa)下用溶劑對固體或半固體樣品進行萃取的樣品前處理技術(shù)，Li等[13]采用PLE法對4種丹參酮進行了提取，提取率高達(dá)98.5%，為下一步的含量測定奠定了實驗基礎(chǔ)。
　　高速逆流色譜法(HSCCC)利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動力學(xué)平衡，是一種連續(xù)高效的液—液分配色譜分離技術(shù)，它的突出優(yōu)點是適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等。Tian等[14]利用多維逆流色譜法的高分離效率，對丹參中4種丹參酮(丹參酮IIA、丹參酮I、隱丹參酮、二氫丹參酮I)進行了分離，每種成分的純度都超過95%。
　　王慶偉等[15]根據(jù)柱層析和真空液相層析法(VLC)從丹參中分離丹參酮，得到了丹參脂溶性主要有效成分丹參酮I、丹參酮ⅡA及隱丹參酮。VLC法是國外有機化學(xué)實驗室較為流行的一種分離方法，其原理相當(dāng)于薄層層析的多次展開，但該方法與薄層層析法相比具有操作簡便、分離速度快、化合物純度高、節(jié)約試劑和處理量較大等優(yōu)點，值得推廣使用。
　　在4種丹參酮中，以丹參酮IIA臨床應(yīng)用較多，因此，對其提取分離的研究也頗多。除了上述研究丹參酮的方法外[16，17]，亞臨界水提取法[18]被用來提取丹參中的丹參酮IIA。亞臨界水提取法利用升高溫度和壓力，水的極性(介電常數(shù))降低(ε<10)，對脂溶性組分溶解能力增加的特性。通過改變溫度和壓力，使水的極性在較大范圍內(nèi)變化，從而使其能在一個較寬的范圍對中等極性乃至非極性的組分具有良好的溶解性，亞臨界水對脂溶性組分溶解能力類似于有機溶劑。該方法提取時間及提取溶劑的消耗大大減少，避免了因使用有機溶劑造成的污染。
　　2.3酚酸類成分的提取分離由于水溶性成分在水中有較大的溶解度，因此，對于丹參水溶性成分的提取主要以水提取[19，20]為主，最近，有關(guān)微波應(yīng)用于丹參水溶性有效成分的提取也有報道[21]。主要的分離方法有大孔樹脂吸附法[22]，HSCCC法[23]。
　　在丹參水溶性成分中，研究丹酚酸B的報道較多。倪力軍等[24]開發(fā)丹參中提取高純度丹酚酸B的新工藝，采用水提—殼聚糖絮凝—過濾—濃縮—醇沉—萃取工藝，本工藝便于工業(yè)化實施。孫金蘭等[25]系統(tǒng)綜述了丹參中丹酚酸B的提取、純化方法，并對超臨界流體萃取、超聲提取法與傳統(tǒng)提取技術(shù)進行比較和論述，結(jié)果是超臨界法萃取法的提取成分最多，其萃取效率也高于回流提取法和超聲提取法的萃取效率。
　　劉敏彥等[26]采用高效液相色譜法比較了煎煮、超聲、索氏提取3種不同提取方法中丹酚酸B、丹參素、原兒茶醛的含量，結(jié)果超聲提取丹酚酸B含量最高,索氏提取丹參素、原兒茶醛含量最高。
　　關(guān)丹等[27]在研究水提法提取丹參中水溶性成分的基礎(chǔ)上，進行了生物酶法提取丹參水溶性成分的研究。生物酶法是選用適當(dāng)?shù)拿福�通過反應(yīng)較溫和地將植物組織分解，加速有效成分的釋放，并可將雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、果膠、淀粉等分解，再選用合適的提取劑提取。結(jié)果表明生物酶法對丹參素的提取率比水提法提取率有極大提高。
　　由于HSCCC法具有簡便、快速等優(yōu)點，故應(yīng)用HSCCC法分離丹參中丹酚酸B的報道較多，陳月娥等[28]應(yīng)用高速逆流色譜分離丹酚酸B，可以從1g丹參粗提物中分離得到了35mg丹酚酸B。Wang等[29]用pH區(qū)帶逆流色譜，可以得到94.1%的丹酚酸B。Li等[30]用HSCCC法從粗提取液中分離得到98%的丹酚酸B，使純度大大提高。
　　3小結(jié)
　　目前，丹參有效成分的提取分離存在提取效率不高，分離純化困難，有效成分純度低等問題。尤其丹參酮ⅡA對光不穩(wěn)定和丹酚酸B受熱分解等因素，進一步限制了一些提取分離方法的使用。隨著微波萃取、生物酶、半仿生提取、CO2超臨界流體萃取、大孔樹脂吸附、超濾、分子蒸餾、高速逆流色譜等新技術(shù)在中草藥有效成分的提取分離純化中的推廣應(yīng)用，高純度有效成分的獲取將成為可能。因此，丹參有效成分提取分離的研究有待進一步開展。
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