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　　期刊簡介：《生物技術通報》（月刊）創刊于1985年，是由中華人民共和國農業部主管、中國農業科學院農業信息研究所主辦的國家級綜合性科技刊物。

　　主要報道：國內外農、牧、林、漁及醫學、輕化等領域中生物技術研究的新進展、新技術、新成果與發展趨勢，內容包括基因工程、細胞工程、酶工程、發酵工程、 蛋白質工程以及生物工程的應用、新的實驗技術與方法等。2008年入選全國中文核心期刊，2006年首批進入中國農業核心期刊。

　　欄目設置：專家論壇、綜述與專論、技術與方法、研究報告、成果與應用、其它。

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　　生物技術通報最新期刊目錄

谷子泛素連接酶U-box E3基因家族的鑒定及響應非生物脅迫分析————作者：何衛;李俊怡;李新妮;馬雪華;邢媛;曹曉寧;喬治軍;劉思辰;

摘要：【目的】基于全基因組水平對谷子（Setaria italica）泛素連接酶U-box (plant U-box protein, PUB)基因家族（SiPUB）進行系統鑒定，為谷子泛素連接酶U-box基因家族的生物學功能研究提供理論支撐。【方法】利用U-box保守Pfam序列全基因組鑒定谷子U-box基因家族成員，采用系統進化樹構建、亞細胞定位預測、預測蛋白的相對分子質量與等電點等理化性質、繪制家...

蘭州百合三個LdBBXs基因的克隆與表達分析————作者：劉鑫;王嘉雯;李進偉;牟策;楊盼盼;明軍;徐雷鋒;

摘要：【目的】B-box (BBX)第Ⅳ亞組的許多成員在光調控花青素苷合成中扮演著重要角色，克隆蘭州百合BBX基因并分析其對不同光照時間的應答及對鱗片變紅的影響，為培育見光不變色蘭州百合品種提供重要的候選基因。【方法】克隆從蘭州百合轉錄組鑒定獲得的3個BBX第Ⅳ亞組成員（LdBBX21、LdBBX22、LdBBX24），并對其編碼的蛋白進行生物信息學分析和亞細胞定位，基于實時熒光定量PCR研究其在蘭州百...

辣椒CaFD1基因克隆、表達特征及功能驗證————作者：彭紹智;王登科;張祥;戴雄澤;徐昊;鄒學校;

摘要：【目的】探究辣椒開花時間調控的分子機制，以及其在應對非生物脅迫反應中的作用，為辣椒的分子育種提供可用的基因資源。【方法】運用RT-qPCR技術，從一年生辣椒（Capsicum annuum L.）‘遵辣1號’莖器官的c DNA中克隆出At FD同源基因CaFD1。借助生物信息學手段，對該基因的理化性質、蛋白結構以及系統進化關系展開分析。利用RT-qPCR技術研究基因在辣椒不同組織以及不同脅迫處理下...

2,4-表油菜素內酯對鎘脅迫下胡蘿卜幼苗生理特性的影響————作者：周志國;樊雙虎;鄧晨;馮雪;

摘要：【目的】分析不同濃度的2,4-表油菜素內酯（2,4-EBR）對鎘脅迫下胡蘿卜幼苗的生長特性、生理指標及鎘吸收轉運相關基因表達的影響，為胡蘿卜對鎘抗性的相關研究提供理論支撐。【方法】以胡蘿卜‘紅芯四號’為試驗材料，采用實驗室水培的方法，研究不同濃度（0.1、0.5、1和1.5μmol/L） 2,4-EBR對CdCl₂脅迫下胡蘿卜幼苗生長特性、光合作用、抗氧化酶活性以及鎘吸收轉運...

蒺藜苜蓿MtZHD4基因克隆、亞細胞定位及表達分析————作者：楊春;王曉倩;王紅軍;晁躍輝;

摘要：【目的】對蒺藜苜蓿（Medicago truncatula） MtZHD4基因進行克隆和表達特征分析，以深入了解其功能，為蒺藜苜蓿生長發育和植物內源激素合成、調控及信號傳導等方面提供理論基礎。【方法】以蒺藜苜蓿‘R108’為材料，克隆得到MtZHD4基因，對其進行生物信息學分析和亞細胞定位，利用實時熒光定量PCR技術對MtZHD4基因在不同組織、不同激素和脅迫處理下的表達模式進行分析。【結果】Mt...

黑土區大豆根際土壤放線菌的分離與功能研究————作者：陳永旗;李志文;李鑫;原若曦;王春旭;韓毅強;高亞梅;

摘要：大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉引起的嚴重土傳病害，會導致大豆產量降低；放線菌是一類重要的生防菌，具有防治該類病害的巨大潛力。【目的】開發黑土區大豆根際土壤中對大豆疫霉具有拮抗作用的放線菌資源。【方法】選擇4種分離培養基，利用稀釋劃線法從健康和患病大豆植株根際土壤中進行菌株分離，通過平板對峙法篩選對大豆疫霉有抑制活性的菌株，并對候選菌株進行培養特征、生理生化特性測定和基于16S rRNA的分子鑒定。【結...

短柄白黃側耳CCMSSC 04611基因組特異性分析————作者：吳澤銀;黃晨陽;趙夢然;張利姣;姚方杰;

摘要：【目的】白黃側耳菌株CCMSSC 04611菌柄短粗，質地硬，菌蓋顏色深，但其菌柄短的分子機制尚不清楚，對其進行全基因組測序組裝，并與長柄白黃側耳基因組進行比較，分析其基因組構成、遺傳變異及短柄形成的原因。【方法】提取白黃側耳CCMSSC 04611的基因組DNA，通過對其形態特征及利用二代Illumina測序平臺和三代pacbio測序平臺進行基因組測序、組裝和注釋分析，比較其與長柄白黃側耳基因組...

基于CRISPR-Cas系統的多重耐藥菌防治技術研究進展————作者：周倩;唐夢君;張小燕;陸俊賢;唐修君;楊星星;高玉時;

摘要：動物源細菌耐藥性影響動物養殖安全，同時對人類公共衛生和食品安全產生重要威脅。抗生素的濫用加劇了耐藥細菌的傳播，而新型抗菌藥物研發日益困難，動物源細菌耐藥污染已成為全球范圍內的公共危機，一旦耐藥菌從動物向人類擴散，將極大地威脅人類健康，我們亟須新的方法和策略應對細菌耐藥。CRISPR-Cas (clustered regularly interspaced short palindromic rep...

球炭疽菌果膠酸裂解酶基因CcPL20552克隆及表達分析————作者：王婷;王一丹;任姝錦;馬婷;金夢軍;楊成德;

摘要：【目的】基于RNA-Seq數據，果膠酸裂解酶候選效應蛋白基因CcPL20552為球炭疽菌致病過程中致病基因之一，且具有效應蛋白的特征。研究CcPL20552基因信號肽功能及其蛋白表達特點，為揭示其基因功能提供依據，也為揭示球炭疽菌的分子致病機制奠定基礎。【方法】以球炭疽菌侵染的馬鈴薯莖稈cDNA為模板，克隆CcPL20552基因CDS編碼區全長以及去除信號肽（-SP）序列，構建帶有His標簽的全長...

SRO家族蛋白在小麥多倍化進程中的演化規律————作者：王軼民;李瑩;董海濤;張恒瑞;常璐;高田甜;韓德俊;吳建輝;

摘要：【目的】旨在系統鑒定和分析小麥SRO基因家族的結構特征、進化規律及其在生物脅迫條件下的表達模式，揭示其在小麥脅迫響應中的潛在作用。【方法】以擬南芥（Arabidopsis thaliana）、番茄（Solanum lycopersicum）和玉米（Zea mays）為參考，對14個小麥族物種的36個基因組進行了SRO基因家族鑒定，并對小麥屬中的二倍體（Triticum urartu v2.0）、四...

轉錄組和代謝組聯合分析探究不同遮光條件下金線蓮類胡蘿卜素合成代謝機制————作者：胡若群;曾菁菁;梁婉鳳;曹佳玉;黃小葦;梁曉英;仇明月;陳瑩;

摘要：【目的】探究不同遮光條件對金線蓮類胡蘿卜素生物合成代謝的影響，解析其類胡蘿卜素積累分子機制。【方法】以金線蓮為實驗材料，分別選取不同遮光處理（T1：遮光25%,T2：遮光50%,T3：遮光75%）葉片，采用高通量RNA測序技術（RNA-Seq）和液相色譜-質譜聯用技術（LC-MS/MS）獲得金線蓮的轉錄組學與代謝組學數據。通過生物信息學分析，鑒定和量化差異基因與代謝物，并探討它們之間的關系。【結果...

RPA-CRISPR/Cas12a結合重力驅動微流控芯片的MTB快檢方法的建立————作者：高暢;莊添馳;李寧;劉云;顧鵬飛;趙昕怡;季明輝;

摘要：【目的】開發一種快速高效的結核分枝桿菌（MTB）檢測方法，給基層單位、偏遠地區的結核病（Tuberculosis）快速篩查提供技術方案，更好的開展結核病的防治工作。【方法】設計RPA引物、crRNA，并引入重力驅動的微流控芯片，建立RPA-CRISPR/Cas12a的片上檢測方法，進一步分析該方法的靈敏度與特異性，使用疑似結核病患者的樣本進行片上檢測和痰培養，比較建立的方法與痰培養法的一致性。【結...

調控棘孢木霉幾丁質酶Tachi2基因的轉錄因子和蛋白的互作研究————作者：曲珊;趙月;李雅華;鄭桂玲;咸洪泉;

摘要：【目的】生防菌棘孢木霉（Trichoderma asperellum） TD3104產生的幾丁質酶Tachi2在植物病害防治過程中發揮重要作用，47號轉錄因子作用于特異響應幾丁質誘導的Tachi2基因啟動子順式作用元件。探究47號轉錄因子與一種新調控蛋白H63的互作關系，為解析幾丁質誘導調控基因轉錄表達機制提供科學依據。【方法】利用酵母雙雜交系統對棘孢木霉幾丁質酶基因Tachi2中47號轉錄因子的...

控制水稻光響應基因ELM1的圖位克隆————作者：杜量衡;唐黃磊;張治國;

摘要：【目的】探究水稻開花期的調控基因與圖位克隆，闡明其開花遺傳與分子機制，完善水稻抽穗期基因的調控網絡，為水稻生產育種提供實踐意義。【方法】以水稻長日照條件下延遲開花突變體elm1為材料，統計開花期等農藝性狀，通過正反交實驗構建群體，統計F2群體表型進行遺傳規律分析，與秈稻Dular構建圖位克隆群體并進行基因定位，并對精細定位區間內候選基因進行測序，結合生物信息學等手段對候選基因進行預測與分析，使用A...

5′UTR區的編輯降低大麥GBSSⅠ基因表達————作者：薛瑞瑩;劉永菊;姜燕燕;彭欣雅;曹東;李云;劉寶龍;包雪梅;

摘要：【目的】大麥是第四大糧食作物，其籽粒總淀粉含量以及直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例是決定大麥品質和特性的關鍵因素之一，直鏈淀粉含量的精細調控對于大麥面粉品質改良具有重要意義。【方法】本研究以大麥Cas9過表達株系為受體，通過BSMV-sg介導的基因編輯系統，對GBSSⅠ基因的5′非編碼區域（5′UTR）進行靶向編輯，實現GBSSⅠ基因表達的精細調控。【結果】14株M0代5′UTR植株的第5分蘗葉片均發生了...

丁香羅勒（Ocimum gratissimum）葉片響應鎘脅迫的比較轉錄組學分析————作者：王斌;王玉昆;肖艷輝;

摘要：【目的】丁香羅勒（Ocimum gratissimum）同時具有修復和安全利用鎘（cadmium, Cd）污染土壤的潛力，解析丁香羅勒響應Cd脅迫的分子機制，鑒定與Cd耐受性密切相關的調控因子，為耐受Cd脅迫的丁香羅勒種質資源創新提供候選基因資源。【方法】采用比較轉錄組學的方法，分析Cd處理（35μmol/L） 72 h期間丁香羅勒葉片的轉錄組學變化。【結果】Cd脅迫顯著抑制丁香羅勒生長，葉片、莖...

高粱TGA基因響應孢堆黑粉菌（Sporisorium reilianum）侵染表達和DNA變異分析————作者：劉卓君;柴文婷;任毅樂;王新宇;朱立勛;趙珊珊;楊博慧;范佳利;李新鳳;趙威軍;呂晉慧;張春來;

摘要：【目的】TGA基因亞家族是b ZIP轉錄因子家族中十分重要的成員。鑒定高粱基因組TGA基因家族成員，進行基因表達和自然等位變異分析，篩選出響應孢堆黑粉菌侵染的TGA基因和順式作用元件。【方法】在高粱全基因組鑒定SbTGAs基因家族成員，并進行染色體定位、基因結構、蛋白理化性質、進化關系、順式作用元件和共線性分析，分析在絲黑穗病菌侵染下SbTGAs的轉錄表達特性，檢測在高粱種質自然群體的DNA變異。...

荷花NnCYP707A1的克隆及功能分析————作者：劉紅利;馬一丹;王婉茹;楊婭茹;賀丹;劉藝平;孔德政;

摘要：【目的】利用荷花具有較強的重金屬吸附能力這一特性，為其參與銅污染防治的植物修復提供優質的基因資源。【方法】基于課題組前期對荷花銅脅迫轉錄組數據的分析，篩選并克隆荷花銅脅迫的關鍵基因NnCYP707A1，利用在線網站及軟件分析其序列特征和進化關系，通過農桿菌注射煙草觀察亞細胞定位情況，通過轉化釀酒酵母、瞬時轉化荷花，分析其對銅脅迫的響應。【結果】NnCYP707A1的ORF全長1 065 bp，編碼...

納米二氧化鈦對植物的毒性效應研究進展————作者：姜麗思;李文遠;張雨祺;楊洋雯迪;劉子瑞;富薇;

摘要：21世紀以來，納米材料的發展和應用愈發迅速廣泛，而納米二氧化鈦（TiO₂ NPs）作為全球年產量第一的納米金屬氧化物，在廣泛應用的同時，也對植物表現出一定的毒性效應，對TiO₂ NPs毒性效應的原理及成因進行系統梳理極具重要性與迫切性。本文歸納了TiO₂ NPs對植物產生毒性的基本途徑，從表觀生長、生理生化、分子水平多層面剖析了Ti...

具備高效CRISPR協同激活活性的HIEC6-dCas9-SAM穩轉細胞株構建————作者：任柱平;楊泰然;雷元三;金留飛;崔古貞;田益明;陳崢宏;

摘要：【目的】以人正常腸道上皮細胞（HIEC6）為研究模型，建立具有高水平轉錄激活活性的HIEC6-dCas9-SAM單克隆細胞株，為利用CRISPR激活（CRISPR activation, CRISPRa）系統篩選人類腸道疾病發生發展相關關鍵基因和探究分子致病機制提供細胞工具。【方法】首先利用PiggyBac轉座子系統構建HIEC6-dCas9-SAM多克隆細胞；然后通過有限稀釋法篩選單克隆細胞株，...

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